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武汉市晶赛生物工程技术有限公司

免疫学实验技术,神经组织细胞分离试剂,siRNA相关试剂

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一个载体编码2条shRNA试剂盒
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产品: 浏览次数:800一个载体编码2条shRNA试剂盒 
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有效期至: 长期有效
最后更新: 2009-09-01 16:18
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详细信息
操作步骤: 1.设计、合成2个19nt的shRNA引物 shRNA1: XXXXXXLOOPXXXXXXAAAAANNNNNN shRNA2: NNNNNNTTTTTXXXXXXLOOPXX19XX X为需要设计的shRNA序列,其余为已知序列。 2.PCR 3.PCR产物克隆到线性化shRNA质粒线性化shRNA质粒被设计成T载体,连接非常方便可靠。载体设计了插入序列蓝白斑筛选、酶切鉴定位点。当然,还可以序列测定。 4.挑取阳性克隆,扩增及纯化质粒。 5.RNAi实验。 客户需知: 不推荐初次接触RNAi工作者使用该试剂盒。虽然该试剂盒设计为简单可靠的分子生物学操作。但RNAi实验涉及有效RNAi序列设计。没有RNAi工作经验者需要设计10-20个siRNA,才能获得较满意效果的siRNA。将序列设计交给专业人员做,可以大大节约有效siRNA序列筛选实验的费用和时间。另外,还存在诸如长片段DNA合成的错误率(30%-80%)、loop环高级结构测序困难、转染级大规模质粒纯化等等。事实上,利用试剂盒自己构建,时间和费用会高于我们的shRNA构建服务。
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